簡要描述:THP-1人單核細(xì)胞白血病種屬:人;懸浮生長;生長周期:3~4天是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系。它來自一位急性單核細(xì)胞白血病患者的血液,有分化為多種巨噬細(xì)胞的能力,是各領(lǐng)域研究常用的細(xì)胞系之一。
產(chǎn)品型號: YKLTHP-1
所屬分類:細(xì)胞庫
更新時(shí)間:2024-04-29
THP-1人單核細(xì)胞白血病THP-1人單核細(xì)胞白血病
種屬:人;懸浮生長;生長周期:3~4天
培養(yǎng)基:RPMI-1640+10%FBS+0.05 mM β-mercaptoethanol+1%P/S
推薦傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到約8x10^5cells/ml左右時(shí),即可進(jìn)行傳代。由于是懸浮細(xì)胞,可直接將細(xì)胞吸出,離心之后傳代。傳代最少濃度不應(yīng)少于1x10^5 cells/ml。
去掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,加入PBS進(jìn)行沖洗,并去上清;
加入YM進(jìn)行潤洗,并去上清;
放入CO2培養(yǎng)箱消化2-4min;
加入培養(yǎng)基終止消化,并吹打均勻。
收貨時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)偽足,或是碎片較多怎么辦?
受到運(yùn)輸影響,懸浮細(xì)胞會短暫性出現(xiàn)形態(tài)改變的現(xiàn)象,如偽足等。通過傳代培養(yǎng),1周左右可以恢復(fù)正常。一些細(xì)胞在運(yùn)輸途中死亡而產(chǎn)生碎片,通過傳代離心可以去除(見上文傳代篇)。
培養(yǎng)過程中細(xì)胞發(fā)生貼壁怎么辦?
少量細(xì)胞貼壁屬于正常情況,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至新瓶中即可。當(dāng)貼壁細(xì)胞的比例高于20%,說明細(xì)胞生長環(huán)境有異常,需排查培養(yǎng)箱設(shè)置、培養(yǎng)基成分,以及培養(yǎng)器皿是否異常。
培養(yǎng)過程中細(xì)胞發(fā)生聚團(tuán)怎么辦?
少量細(xì)胞聚團(tuán),呈葡萄串狀,屬于正?,F(xiàn)象,特別是細(xì)胞密度較低時(shí),易出現(xiàn)這種情況。更換血清品牌或增大血清比例(不超過20%)有助于解決聚團(tuán)問題。不建議將聚團(tuán)的細(xì)胞吹散,等待密度高時(shí),會自己分散開。
培養(yǎng)基里一定要加β-巰基乙醇嗎?
β-巰基乙醇是一種常用的培養(yǎng)補(bǔ)充劑,有抗氧化的作用,可減少氧化應(yīng)激對THP-1細(xì)胞的影響。當(dāng)細(xì)胞密度過大但需要維持時(shí),可適當(dāng)增加巰基乙醇的比例(不超過標(biāo)準(zhǔn)量的1.5倍)。
鏡下觀察時(shí),難以聚焦或估算密度怎么辦?
懸浮細(xì)胞會隨著液體流動,不容易聚焦,靜置5-10分鐘使細(xì)胞沉底,之后在輕輕放上顯微鏡觀察,將有助于聚焦和估算細(xì)胞密度。