A549/DDP人肺腺癌耐株介紹:
種屬:人;貼壁生長;生長周期:3~4天
培養(yǎng)基:培養(yǎng)條件
F12K培養(yǎng)基(添加NaHCO3 2.5g/L, DDP 1.0mg/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
細胞描述:
細胞生長:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞數量:1×106個
細胞傳代:1:3~1:8傳代;2~3天換液1次
細胞特性:A549細胞通過DDP間接誘導的方法(DDP起始濃度為1ug/mL,逐級提高DDP濃度,直至細胞能在28ug/mL DDP的培養(yǎng)液中穩(wěn)定生長
A549/DDP人肺腺癌耐株傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。